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抗原提呈中外泌体的作用
树突状细胞是免1疫系统中分泌外泌体活跃的细胞。树突状细胞是抗原提呈细胞的一种,能通过吞噬入1侵体内的细菌等异物,在切断抗原肽后,与 MHCⅡ类分子结合并提呈在细胞表面来激1活T细胞。细胞内的抗原肽利用MHCⅠ类分子提呈,树突状细胞分泌的外泌体携带MHCⅠ类和Ⅱ类分子,胞外囊泡NTA检测,它们分别与抗原特异性CD8+ 细胞杀伤性T细胞、CD4+ 辅助T细胞的T细胞受体结合,在远离树突状细胞处也可以激1活T细胞。
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外泌体介导细胞间的信号交流,是目前外泌体研究中十分热门的领域。外泌体中有丰富RNA以及蛋白,其中RNA的种类包括miRNA,LncRNA,mRNA等[1]。大量文献报道,这些RNA在细胞间的相互交流中发挥着巨大的作用。如,外泌体中miRNA可以调节下游细胞对胰岛素的敏感性。在研究中,作者培养脂肪组织巨噬细胞(ATM),并收集培养基中富含miR-155的外泌体,作用于下游的脂肪细胞和肌细胞。miR-155可以结合Argonaut蛋白,并募集下游的目标mRNA,从而影响细胞对胰岛素的敏感性和对葡萄糖的耐受性[2]。此外,外泌体中的LncRNA可以调控下游细胞的转录水平[3],mRNA、蛋白等可以通过外泌体转运至下游细胞,并在胞内进行翻译
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iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation,同位素标记相对和绝1对定量)是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种(或4种)不同的同位素试剂来同时标记和比较8种(或4种)不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成:报告部分,肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数,肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连,可标记所有酶解肽段,平衡部位可***iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比,因此改变任一iTRAQ试剂,不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测,分子量都完全相同。而在串联质谱中,同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰,因此,根据波峰的高度及面积,可以得到蛋白质的定量信息。
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